【家禽细菌性疾病专栏一】家禽细菌性疾病——概况

来源:国外畜牧学-猪与禽    作者:    人气:    发布时间:2020-12-10    
家禽细菌性疾病——概况
 

王晶晶 译 唐彩琰 审

摘 要:生产健康的1日龄雏鸡,是内部或外部评估孵化场生产质量的关键标准。本文探讨了孵化场和种鸡场卫生的各个方面,以及这些方面如何影响1日龄雏鸡的健康和生产性能。

关键词:雏鸡;种鸡;细菌;检测;评估

细菌是造成孵化场众多卫生问题以及引发种鸡多种重要疾病的主要原因。在讨论具体细节之前,我们先概括性了解细菌的基本情况。

细菌是在各种环境中繁衍生息的微小单细胞生物。这些生物一般生活在土壤、水以及人类和动物的消化道中,有时也生活在一些特殊的环境中,例如新西兰和美国加利福尼亚州的间歇泉和温泉。细菌有许多不同的类型,没有一种细菌能够适应所有的栖息地,随着时间推移,细菌不断进化并定植在不同的特定栖息地。

人类与细菌的关系很复杂。有时细菌是有益的,例如化粪池中、抗生素生产中、酸奶生产中的细菌;有时它们又可能对人类造成危害,如腐烂过程中和变质食物中的细菌会引发破伤风和某些肺炎等疾病。细菌也可能是某些抗生素耐药性基因的携带者。

细菌可视为微小动物,具备大型动物的所有生物学功能,包括消化、呼吸、繁殖、加工、运动和废物处理等。

 
1  原核生物
 

细菌属于原核生物。原核生物是没有细胞核的单细胞生物,其DNA要么以扭曲的线状团块形式自由漂浮,要么存在于质粒的单独环状片段中。细菌细胞中的核糖体能利用编码信息将氨基酸组装成蛋白质。

细菌周围通常有两个保护层,即细胞壁和细胞膜。有些细菌没有细胞壁,如支原体。支原体与种鸡的一些重要疾病有关。

一些细菌有第三层膜,也就是最外层膜,称为荚膜。许多细菌表面都有不同长短的鞭状附件,长的称为鞭毛,较短的称为菌毛。这些结构可以帮助细菌运动(通常在水膜中)以及附着在物体表面。

细胞壁在革兰染色法中起关键作用。革兰染色法根据细胞壁的结构来区分细菌。细菌被染成紫色的为革兰阳性菌,被乙醇脱色后复染成红色的为革兰阴性菌。

由于工具简陋,早期科学家在细菌研究方面受到一定限制。实际上他们只有一种工具,即光学显微镜,因此他们只能观察细菌的形状。最初观察到的许多细菌都是根据它们的形状命名的。这些名称包括“球菌”(用于在显微镜下看起来像小球体的细菌)和“杆菌”(用于在显微镜下看起来像棒状的细菌)。这些词可以在逻辑上与“葡萄状”和“链状”等词组合使用。

 
2  检测
 

我们可以用各种检测手段来确定孵化场或种鸡场中细菌的存在情况,并给出细菌的数量。在孵化场检测微生物,是为了确定肉眼可见清洁是否也是微生物级别的清洁。从逻辑上可以推断,如果某些部位有明显的污点或污块,那么它肯定也污染了微生物。因此,在检测微生物之前,有必要先行查看,找出脏污的部位或确认所有部位为肉眼可见清洁。

2.1  确定目标

在开始检测微生物之前,重要的是要先确定检测的目标。这会严重影响采集样本的类型和数量,以及所需拭子或其他采样包的类型和数量,同时也会影响检测时间。在彻底完成清洁之前,没有必要取样来评估清洁的有效性。另外,检测的内容也很重要。如果要评估孵化场的总体清洁度,可以用拭子进行细菌计数,但如果要评估沙门菌或曲霉菌的污染状况,最好使用孵化器中的绒毛样本。

2.2  选择实验室

首先需要确定完成检测工作的实验室。为此,需要明确选择标准,这些标准可能包括:

● 实验室资质和所能完成的特定检测;

● 完成所要求检测的经验或能力;

● 知晓孵化场相关知识,具备相关工作经验;

● 确定报告接收时间和方式;

● 进行法定检测以及贸易或出口检测时,政府对该实验室结果的认可度;

● 孵化场所在审定机构对该实验室结果的接受程度。

明确取样人员(孵化场工作人员、实验室工作人员、公司的质量检查员或兽医团队成员)。无论交由谁来完成这项工作,有两点很重要。首先,他们需要工具来完成这项工作;其次,他们需要接受培训。就工具而言,重要的是要检查工具或设备是否齐全,以及额外准备一个或两个备用零件,防止出现意外情况。

2.3  需要了解的事项

首先要了解检测场所的清洁程度,可使用活菌总数这个参数。其次,要了解粪便指示物以及数量。这些指示物可以显示粪便是否存在其他细菌和病毒,例如沙门菌、弯曲杆菌、新城疫病毒和呼肠孤病毒等。粪便指示物也可以显示是否存在非禽类粪便,例如来自大鼠、小鼠、蜥蜴、昆虫、狗、猫和人的粪便。典型的粪便指示物是大肠菌群、肠杆菌和粪便链球菌。第三,要了解家禽中重要细菌的特点,例如沙门菌、葡萄球菌等。

 
3  细菌检测
 

3.1  培养

细菌培养的目的是使细菌生长繁殖并产生足够数量的纯细菌以用于进一步检测。为此,我们为细菌提供了理想的生长条件——营养和水分供应,合适温度和逆境保护。对于某些细菌,还需要提供不同的环境,例如厌氧或微需氧环境。细菌通常在需氧条件下生长。

细菌在培养板底部的琼脂层上生长。琼脂含有细菌生长所需的营养和水分。将怀疑含有细菌的样本涂在琼脂层表面,然后将培养板放在指定温度的培养箱中孵育24 h或更长时间。细菌处于理想生长条件时会迅速生长和繁殖。当肉眼可以看到它时,称其为菌落。

3.2  传代培养

培养板上获得的培养物通常含有不同的菌落(细菌)。我们需要将其进一步纯化,可以选择一个典型的菌落进行传代培养。方法是从培养板上挑一个菌落,将其转移到另一个培养板上划线培养。划线培养是一种在培养板上划开来稀释细菌的方法。它可以在条带中产生单个纯菌落,这些纯菌落可用于进一步研究。

3.3  细菌计数

许多情况下我们需要知道细菌的数量。为此,我们取已知数量的样本,将其放入已知体积的无菌稀释液中。如果将1.0 g样本放入9.0 mL稀释液中,然后取1.0 mL所得溶液涂于培养板上,其每产生1个菌落就相当于被测样本中有10个细菌。因此,如果我们在培养板上得到4个或21个菌落,那么样本中的细菌数量就是40个或210个。如果取    1.0 mL该溶液加入另外的9.0 mL稀释液中,那么就得到了稀释100倍的溶液,细菌计数将分别为400个或2 100个。重复该步骤,直到获得数百万或数十亿的细菌计数。

3.4  微生物检测

微生物检测主要用于种鸡场和孵化场,用来确定是否存在细菌和(或)真菌。这一过程通常需要检测两个项目。首先,对存在的所有微生物进行常规筛查,作为微生物清洁度的一般性指标。这对于评估清洁程序的有效性很有用。其次,筛选一种特定的微生物,例如沙门菌或烟曲霉)作为排查问题的一部分(如烟曲霉可以用来检测1日龄雏鸡或种鸡群的健康状况。

在详细介绍之前,我们先了解有关卫生检测的一些常规问题。这可用于确定肉眼可见清洁是否污染了微生物。例如,如果我们已经看到待检测的区域很脏,那么花钱检测微生物将没有意义。这突出了肉眼评估的重要性。

3.5  肉眼评估

肉眼评估是将你看到的内容写进报告中。这需要一种系统的方法确保将所有看到的内容都包括在内。目前明智的做法是评估时随身携带一台数码相机,将所见的一切拍下来。这些照片在编辑评估报告或与孵化场和种鸡场管理层或工作人员反馈意见时非常有用。

可以给所检测的孵化场的每个项目打一个分数,这些分数可以用来做趋势分析。此外,也可以将这些分数加起来,创建一个卫生指数,从而给出孵化场的整体卫生状况。卫生指数也可以用于趋势分析。

3.6 微生物评估

在微生物评估中,我们需要定性和定量分析存在的细菌。这些评估分为两种类型。首先,对存在的细菌总数进行评估,例如,评估清洁方案或消毒剂的有效性;其次,确定是否存在特定微生物,例如沙门菌或烟曲霉,从而确定种鸡场或孵化场的污染状况。

微生物检测的要求包括:确定检测目的;确定检测实验室;确定需检测的微生物;确定报告接收人;确定样本采集人;确保检测所需的设备、拭子、容器、记号笔齐全;确保所有人都知晓即将检测;确定样本采集、处理和储存方式,以及如何运送到实验室;确定后续工作负责人。

3.7  微生物检测

微生物检测,即用微生物方法来确定肉眼清洁就是微生物清洁。这涉及两个关键阶段:样本采集和实验室检测。我们会检测以下内容:

● 与特定问题相关的重要细菌,例如沙门菌、假单胞菌和曲霉菌等。

● 如果检测到通常只在粪便中出现的微生物,那么表明样本污染了粪便。这些细菌包括大肠杆菌、大肠菌群、粪便链球菌和肠杆菌。

● 活菌总数是指将所有细菌(有益菌和有害菌)合在一起的总数。这是常规清洁和清洁效果的良好指标。

● 表示特定人员或产品问题的细菌,例如金黄色葡萄球菌。

你需要知道细菌最有可能潜藏的位置。我们遵循的理念是找出问题的根源才能纠正它们并推动孵化场的标准向前发展。通过检测我们知道设施设备表面很干净,没有细菌。

在考虑具体的采样方式之前,我们需要了解样本采集的一些常规要点。首先,用于采集样本的任何工具都必须是无菌的。如果我们把拭子弄脏了,例如掉在地板上,那么必须扔掉它。其次,每个拭子必须清楚地标出擦拭部位,并且每个样本都必须标明类型和来源,例如“绒毛,孵化器,23号”。

一种简单的方法是对每个拭子和样本进行唯一编号,然后在提交表上列出这些编号,并详细说明每个样本是什么。

目前主要使用两种擦拭技术——带有木杆的拭子和纱布拭子。如果我们要统计细菌的数量,可以以每个拭子或每平方厘米为单位报告结果。

计数时确保所检测的区域是平坦的,擦拭的区域通常为9 cm2或16 cm2,可用一个含有9 cm2或16 cm2孔的金属模板确定。采样前最好用火焰对模板消毒,然后将模板放在要采样的区域上。用湿拭子在待测区域上平行于正方形的每一边擦拭5次,总共20次。

 

 

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责任编辑:闪电
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